بررسی بیان گیرنده های erbb1 و erbb2 در رده های سلولی cho و hek-293 با روش کمی real-time pcr

خانواده گیرنده های her نقش مهمی در پیشبرد شبکه انتقال پیام قدرتمند درون سلولی دارند و از این طریق قادر به تنظیم رشد سلول می باشند، عدم تنظیم این گیرنده ها در سرطانهای متعددی دیده می شود. her1 و her2 دو گیرنده آنکوژنیک مهم از این خانواده می باشند که بعنوان اهداف درمان سرطان بخصوص درمان سرطان پستان در نظر گرفته می شوند. رده های سلولی از جمله ابزارهای آزمایشگاهی مهم در زمینه آنالیزهای مولکولی و همچنین آنالیزهای مربوط به درمان های هدفدار سرطان می باشند. از آنجائیکه نیاز به آگاهی از میزان دقیق بیان این گیرنده ها در رده های سلولی، در مطالعات مربوط به این گیرنده ها مخصوصاً درمان های هدفدار احساس می شود، هدف از انجام این تحقیق نیز بررسی دقیق بیان این گیرنده ها در رده های سلولی cho و hek-293 است. بیان مطلق و نسبی گیرنده های her1 و her2 در رده های سلولی cho، hek-293، mda-mb-468 (کنترل مثبت her1) و skbr3 (کنترل مثبت her2) با استفاده از روش کمی real-time pcr انجام شد. بیان مطلق با استقاده از پلاسمیدهای رقیق شده her1 و her2 انجام گرفت. بیان نسبی این گیرنده ها نیز با استفاده از ژن رفرنس hgprt و روش 2- ??ct مورد ارزیابی قرار گرفت. نتایج نشان داد که رده های سلولی cho و hek-293 قادر به بیان گیرنده her1 نمی باشند اما رده سلولی mda-mb-468 و skbr3 به ترتیب بیان بالا و پائینی از her1 را نشان دادند. میزان بیان her2 در سلولهای cho و hek-293 با استفاده از روش مطلق نشان دهنده وجود 2 10× 4075/9 گیرنده her2 به ازای 1 میکروگرم rna سلول cho و105 ×13775/1 گیرنده her2 به ازای 1 میکروگرم rna سلول hek-293 است. این امر با روش نسبی نیز به اثبات رسید، و رده های سلولی cho، hek-293 و mda-mb-468 سطح بیان کمتری را نسبت به skbr3 نشان دادند که به ترتیب برابر با 007/0، 01/0 و 001/0 برابر با skbr3 می باشد. از آنجائیکه رده های سلولی cho و hek-293 قادر به بیان گیرنده her1 نیستند، بنابراین این رده ها مدل های آزمایشگاهی مناسبی جهت استفاده در مطالعات مربوط به این گیرنده ها بخصوص مطالعات مربوط به بیان هترولوگ آن می باشند. اما به دلیل بیان گیرنده her2 در این رده های سلولی، نمی توان از آنها در مطالعات گفته شده و هم چنین بعنوان رده های سلولی کنترل استفاده نمود اما این رده ها، مدل های مناسبی جهت مطالعات پیرامون خانواده گیرنده رشد اپیدرمال مناسب هستند.